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温州医学院药学院生物技术制药课件第八章 微生物转化
利用微生物转化方法对豆蔻明进行结构修饰, 分离得到刺囊毛霉3.3450对豆蔻明的两个新的糖苷化转化产物, 利用ESI-MS、1H NMR、13C NMR和2D NMR技术鉴定其结构分别为4-O-β-D-glucopyranosyl-6- hydroxy-2-methoxychalcone (1, 4-GluC) 和 6-O-β-D-glucopyranosyl-4-hydroxy-2-methox...
人肠内细菌菌丛或单菌株及其酶与中药化学成分在37 ℃、厌氧条件下共温孵,转化产物用溶剂法提取、柱色谱法分离、谱学法鉴定化学结构。根据转化产物与原形药物和/或化合物的结构特点,并结合酶催化反应,推断转化机制。建立人肠内细菌转化中药化学成分的模型和标准操作规程,用于研究和评价中药化学成分在肠内的生物转化。所建立的人肠内细菌生物转化模型,操作简单,对中药化学成分结构具有转化能力。转化方式既可采用生长细胞...
设计了生物转化产品L-山梨糖及其中残余D-山梨醇的衍生化GC测定方法。以乙酸酐—吡啶(1∶1)为衍生化试剂对样品中残余D-山梨醇进行乙酰化GC测定,再以四氢硼钠为还原剂、乙酸酐为乙酰化试剂对样品中L-山梨糖进行还原乙酰化GC测定。结果表明,D-山梨醇及L-山梨糖分别在0.01999~2.999μg及4.00~24.00μg范围内呈线性。本法精密度及回收率均较好,可用于监测L-山梨糖生物转化终点及其...
简单节杆菌A1及耻垢杆菌MS1两种菌混合培养转化地塞米松中间体5α-△9(11)-16α-甲基-3μ,17μ,21-三羟基-孕甾烯-3μ,21-双醋酸酯-20酮(Ⅲ)可得到16α-甲基-△1.4.0(11)-孕甾烯-17α,21-双羟基-3,20双酮(Ⅳ)(65%收率)及少量的16α-甲基-△1.4孕甾烯-9α,11α-环氧-17α,21双羟基-3,20双酮(Ⅴ)。
16α-甲基-3β,17α-二羟基-5α-孕甾-20酮-3β-醋酸酯的微生物转化
研究芍药苷和芍药内酯苷的微生物转化。 方法 : 从18种真菌中筛选出分别对芍药苷和芍药内酯苷转化能力强的菌株进行转化,采用色谱和波谱技术分离鉴定转化产物。 结果 : 对芍药苷和芍药内酯苷转化能力较强的菌株分别是短刺小克银汉霉AS 3.970和总状共头霉AS 3.264。短刺小克银汉霉AS 3.970可将芍药苷转化为芍药内酯苷,总状共头霉AS 3.264可将芍药内酯苷转化为芍药苷。 结论 : 特定条...
本项目开展了极端条件(超临界相态或高压)下微生物活性的研究。设计、制造了一套可进行超临界生化反应的小型装置(最大压力80 kg/cm^3)。在此设备中分别多种实验条件对酵母菌和梨头霉活性的影响。发现在超临界二氧化碳条件下影响微生物活性的主要因素是pH,而不是高压;当压力在0.5至1 MPa时,酵母菌生产海藻糖的能力较常压下提高20%。进行了酵母菌与梨头霉的高密度培养的研究。为提高菌体的稳定性,探...
甲基睾丸素作为性激素类药物,如母核经C1,2位脱氢反应生成美雄酮后可使其活性大大增加,并减弱雄性激素样作用。本项目应用微生物脱氢法研制了美雄酮的转化工艺,并对其进行逐级放大,最后在5m^3发酵罐上进行试验,确定了工艺路线,优化了工艺参数。在5m^3发酵罐中连续试生产多批,单批投料浓度10g/L,转化时间40~46h,其转化率达到84.2%。确定美雄酮的分离提取工艺,滤饼收率达到100%~105%...
该项目以生物催化技术为核心,着眼于新酶源的目的性筛选及应用。通过先目的性富集,再高通量筛选的方法筛选到可以将多唾液酸神经节苷脂高效转化为GM1的菌种,经鉴定是转化生产GM1的新菌种,具有完全资助的知识产权。通过确定新菌种转化生产GM1的合适生产工艺,GM1收率达到国际领先水平。现已将技术转让给齐鲁制药厂。
本项目以CO_2激光辐射选育高产神经酰胺酶菌株AE 255-6,产酶活性高,酶催化水解定向性强,结合态神经酰胺的水解率高。与亲株AE 255相比,这种酶活性提高6倍,使结合态神经酰胺的水解率达90%以上,发酵物料中,游离态神经酰胺含量由发酵前的0.024%左右增至0.07%以上。通过AE 255-6变异株生产的神经酰胺产品经检测,纯度达到99.2%。本项目通过对发酵、提取后糠渣的有效利用开发出...
该技术从天然源采样分离筛选、突变选育得到的一株高转氨酶活性产生菌株红酵母Rhodotorula CIBAS A1401;利用国内农副产品原料,选出合适的工业发酵培养基配方,建立起全套的液体深层培养发酵、生物转化肉桂酸生产L-苯丙氨酸的生产工艺,为解决国内紧缺的阿斯巴甜(AMP)关键原料L-苯丙氨酸起了重要作用,用以替代进口医药级、食品级的原料L-苯丙氨酸。该产品是人体必需的8种氨基酸之一,既是一...
该课题以重组质粒转化蛋氨酸营养缺陷型菌株,从中筛选出具有传代稳定性和高效表达SHMT的基因工程菌BSX-6。重组质粒pET-17b-glyA中插入f5基因片段,使构建的SHMT基因工程菌带有传代稳定基因,保证了该工程菌可永久传代,变异性极小。将E.coil JM-109进行诱变,获得了一株蛋氨酸营养缺陷性菌株。实现了高底物(甘氨酸)浓度(≥3mol/L)条件下的酶促转化反应。该工艺的研制成功具有良...
该技术采用生物酶解法将黄酮糖甙转化为黄酮甙元,所选用的酶为柚苷酶。柚苷酶是由柚皮苷酶、鼠李糖酶和普鲁宁葡萄糖苷酶所组成的一个酶系,可以将酸橙、葡萄等水果中的一种产生苦味的黄酮类化合物-柚苷(柚配质-7-芸香糖苷)分解为柚配质和糖。所以本实验利用柚苷酶这一性质,将黄酮糖甙化合物的糖苷键断开,使甙元及糖分解,得到甙元黄酮。采用该工艺生产的甙元黄酮比传统黄酮产品附加值提高10~15%。
建立人肝微粒体体外生物转化利多卡因的方法。方法分别改变反应体系中人肝微粒体的浓度、生物转化时间、利多卡因的浓度,以高效液相色谱(HPLC)法测定利多卡因及其代谢产物单乙基甘氨二甲基苯酰胺(MEGX)和甘氨二甲基苯酰胺(GX)的含量。结果最佳的生物转化条件为:2.0 mg·L-1利多卡因在1.0 g·L-1微粒体中,生物转化60 min。结论该方法快速有效,可用于利多卡因在人肝微粒体体外代谢的研究。

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