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构建CXCR4质粒并转染小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC),与低氧/复氧(hypoxia/re-oxygenation,HR)预处理的肾小管上皮细胞(RTEC)共培养,观察CXCR4-BMSC对HR-RTEC的修复效应并探讨其机制。 方法 采用基因转染技术获得CXCR4-BMSC(CXCR4-BMSC/eGFP,eGFP为示踪基因)和null-BMSC(BMSC/eGFP),检测转染细胞的CX...
构建多发性骨髓瘤(MM)细胞与骨髓间充质干细胞(MSC)共培养体系,探讨共培养后MSC连接蛋白43(CX43)表达及基质细胞衍生因子(SDF)-1α分泌水平变化及其意义。方法 用Western blot、免疫荧光法检测MM细胞系及MM原代细胞CX43 的表达及SDF-1α分泌水平。建立间接及直接共培养体系共培养MM细胞和MSC,然后用CD138 磁珠法分离RPMI 8226 细胞及MSC。用实时...
聚己内酯/丝素蛋白复合支架与人永生化尿路上皮细胞系共培养的实验研究
丝素蛋白 组织工程 聚己内酯 膀胱黏膜
2014/2/21
探讨人永生化尿路上皮细胞系(immortalized human bladder urothelium cell line)SV-HUC-1在聚己内酯/丝素蛋白[Poly(ε-caprolactone)/silk fibroin,PCL/SF]支架中的生长情况,为进一步体内组织修复提供依据。方法 制备疏松多孔的PCL/SF支架材料,SV-HUC-1传代扩增后,接种在PCL/SF上,体外培养7 d后...
大鼠骨髓间充质干细胞与脱细胞脊髓支架体外共培养
骨髓间充质干细胞 脱细胞脊髓支架 细胞共培养 组织工程
2013/11/14
评价脱细胞脊髓支架在大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)体外培养中的作用,探索最佳接种浓度。 方法 分离、培养及鉴定SD大鼠BMSCs,诱导BMSCs向神经元样细胞分化。制备脱细胞脊髓支架,将第3代BMSCs同脱细胞脊髓支架共培养,MTT法检测细胞增殖活性,比较与普通培养的差异;取第3代BMSCs以不同浓度...
观察血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)对共培养体系中(EPCs+SKOV3)内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的成管能力和MMP-2、MMP-9的表达影响。 方法 采用密度梯度离心法分离EPCs,先在Matrigel基质胶中测定其成管能力,再与SKOV3共培养后测定成管...
共培养条件下电磁场干预对大鼠成骨细胞及骨髓间充质干细胞成骨分化的影响
电磁场 成骨细胞 骨髓间充质干细胞 共培养
2013/6/4
目的观察共培养条件下电磁场干预对大鼠成骨细胞及骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨定向分化的影响,并探讨电磁场促进成骨分化的相关机制。 方法体外分离培养SD大鼠BMSCs及成骨细胞,将第三代成骨细胞与BMSCs通过transwell培养小室建立共培养系统。采用随机数字表法将共培养细胞分为共培养组及共培养暴磁组,另随机选择单细胞培养的BMSCs及成骨细胞纳入单细胞培养组。共培养暴磁组细胞每日给予电磁场刺...
目的:探讨细胞共培养技术及其在骨软骨组织工程中的应用。方法:在CNKI数据库和Pubmed中检索近年来有关细胞共培养技术及其在骨软骨组织工程中应用的相关文献,进行汇总分析。结果:细胞共培养技术诱导干细胞向体细胞分化、维持细胞的功能和活力、对细胞增殖进行调控,有效地扩大了骨软骨损伤修复所需的种子细胞源。结论:细胞共培养技术充分模拟了体内环境,使细胞间能相互沟通信息,相互支撑生长增殖,使其成为组织工程...
共培养下后交叉韧带成纤维细胞中MMPs的基因表达
后交叉韧带 滑膜 共培养 基质金属蛋白酶
2012/10/23
研究后交叉韧带(posterior cruciate ligament, PCL)成纤维细胞与滑膜细胞共培养下,2种细胞之间的交流对PCL成纤维细胞中基质金属蛋白酶MMP-1、2、3表达及活性的影响。 方法 分为共培养组和单培养组:①用显微镜观察共培养24 h后细胞的活性和迁移率。②分别培养6 h后,提取总RNA,逆转录PCR;实时荧光定量PCR对人后交叉韧带成纤维细胞MMP-...
人脂肪干细胞与猪尿路上皮细胞隔离共培养后向尿路上皮样细胞分化
脂肪干细胞 尿路上皮细胞 组织工程
2012/4/28
研究人脂肪干细胞与猪尿路上皮细胞体外隔离共培养后向尿路上皮样细胞转化的可行性。方法 从人抽脂术后脂肪组织中提取脂肪干细胞,同时从猪膀胱中获取尿路上皮细胞,两种细胞体外培养扩增后,通过“Trans-well”体系进行体外隔离共培养3周。倒置显微镜下观察脂肪干细胞形态变化。RT-RCP鉴定诱导后人脂肪干细胞中尿路上皮特异性标记Uroplakin-Ⅱ在基因水平的表达,免疫荧光鉴定AE1/AE3和Urop...
探讨白细胞介素(IL)1β,1Rα在胚胎内膜共培养体系中的作用。方法 选取昆明种雌性小白鼠30只(6~8周龄),雄性15只(12~16周龄)进行实验。30只雌鼠成功妊娠后,收集雌鼠8细胞期胚胎并进行子宫内膜腺上皮细胞原代培养。共培养成功7份原代子宫内膜细胞,每份细胞分别接种35孔(n=35×7)。5孔细胞培养液中不做任何处理(对照组,n=5×7),其余30孔根据上皮细胞培养液中所含IL-1β浓度不...
血管内皮细胞-平滑肌细胞共培养体系研究进展
内皮细胞 平滑肌细胞 共培养 相互作用
2012/3/21
血管内皮细胞(endothelial cells,EC)和血管平滑肌细胞(smooth muscle cells,VSMC)的相互作用、相互影响维持血管生理功能和多种疾病的发生发展,EC-SMC联合培养模型是目前研究这2种细胞间相互影响的最佳方式。作者对现有的EC-SMC共培养模型及共培养对这2种细胞结构和功能的影响进行综述,为在微观上深入研究二者的相互关系提供依据,也为建立更接近机体生理/病理状...
摘要目的:建立细胞共培养体系,观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)对正常及损伤的脊髓神经元的影响。方法:选取新生7d的大鼠,无菌条件下分离骨髓间充质干细胞。选取新生24h的大鼠,无菌条件下分离脊髓背根神经节神经元,并制备机械损伤的模型细胞。用Transwell 可渗透培养皿构建共培养体系,通过细胞形态学,免疫细胞化学方法进行细胞纯度鉴定,观察不同条件作用下神经元特异性烯醇化酶(NSE)阳性细胞的存活...
摘要目的:建立细胞共培养体系,观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)对正常及损伤的脊髓神经元的影响。方法:选取新生7d的大鼠,无菌条件下分离骨髓间充质干细胞。选取新生24h的大鼠,无菌条件下分离脊髓背根神经节神经元,并制备机械损伤的模型细胞。用Transwell 可渗透培养皿构建共培养体系,通过细胞形态学,免疫细胞化学方法进行细胞纯度鉴定,观察不同条件作用下神经元特异性烯醇化酶(NSE)阳性细胞的存活...
冷冻保存后成人胰岛细胞与小肠黏膜下层的共培养
冷冻保存 成人 胰岛细胞 小肠黏膜下层
2009/7/30
目的: 探讨猪小肠黏膜下层 (SIS) 对冷冻保存后的胰岛细胞的支持和保护作用. 方法: 分离纯化后的成人胰岛细胞经冷冻保存1 mo后分为SIS组和对照组, 在RPMI-1640培养液培养1 wk后分别测定两组的胰岛细胞回收率, 观察胰岛细胞形态并进行胰岛素刺激释放试验. 结果: SIS 组胰岛细胞回收率为90.5±1.8%, 较游离组62.7 ± 3.6%显著提高 (P< 0.05), 胰岛形态...
人绒毛外细胞滋养层细胞与蜕膜基质细胞共培养模型的建立
2007/7/25
胚泡着床及胎盘形成是胚泡与母体之间协同作用的极其复杂的过程。这一过程顺利完成有赖于源自来自胚胎的细胞滋养层细胞(cytotrophoblasts,CTB)分化的绒毛外滋养层细胞(EVCT)的侵袭。而来自母体的蜕膜组织影响EVCT的侵袭能力,一方面蜕膜组织中细胞外基质处于在不断更新代谢的动态平衡中,另一方面,蜕膜组织能够产生多种细胞因子以及生长因子,调节滋养层细胞的多种基因表达[1]。因此,建立EV...