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搜索结果: 1-15 共查到临床医学 RNAi相关记录19条 . 查询时间(0.079 秒)
膀胱癌是泌尿系统高发肿瘤,浅表性膀胱癌发展成为浸润性膀胱癌后,预后较差。该研究利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默rictor基因后,观察其对人膀胱癌T24细胞在体内外生长的影响。方法:构建3个rictor-RNAi表达载体(1#、2#和3#)和1个阴性对照载体。采用瞬时转染和稳定转染技术筛选出干扰效果明显的单克隆稳定细胞株。应用细胞计数试剂盒(cell count...
研究靶向Hiwi 基因的siRNA对乳腺癌细胞增殖的影响。 方法:将靶向Hiwi基因的siRNA导入乳腺癌细胞,培养并转染MCF-7细胞,运用qRT-PCR、Western-Blot进行干扰效果的检测并使用CCK-8法检测干扰后MCF-7细胞的增殖和凋亡情况。 结果:干扰后48 h和72 h的MCF-7细胞无明显生长抑制作用(P>0.05),而干扰后24 h的Hiwi-647组细胞的生长抑制作用明...
探讨RNAi沉默MACC1基因表达对乳腺癌MCF-7细胞增殖及迁移的影响及相关的分子机制。 方法 化学合成针对MACC1基因的荧光标记的siRNA-FAM,利用 siRNA 转染试剂将MACC1特异性siRNA-FAM转染至乳腺癌MCF-7细胞;采用RT-PCR检测siRNA 对MACC1 mRNA表达的影响,Western blot检测siRNA对MACC1蛋白合成的影响;M...
研究pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒对人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,阐明RNA干涉技术在卵巢癌生物治疗领域中的作用。方法:应用人卵巢癌细胞系SKOV3对15例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型,随机分为3组:对照组(生理盐水)、空质粒对照组及重组质粒组(pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3)。应用电子穿孔仪将质粒转入裸鼠移植瘤内,观...
构建GSK-3β基因特异性短发卡状(shRNA)干扰载体,观察RNA干扰技术对卵巢癌SKOV3细胞GSK-3β基因表达的抑制作用,并且探讨促进紫杉醇药物敏感度的机制。 方法设计合成并构建针对GSK-3β mRNA的特异性shRNA干扰质粒,将干扰质粒转染SKOV3细胞。筛选稳定转染的单细胞扩大培养,应用RT-PCR、Western blot方法检测各组细胞GSK-3β表达抑制情况。流式细胞学检测法...
构建人NOB1基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体并在卵巢癌SKOV3和HEY细胞上定其沉默效率。 方法:针对NOB1基因设计特异性siRNA靶点,构建于慢病毒pLVTHM载体,筛选获得的有效shRNA慢病毒载体在293T细胞包装成病毒颗粒,随后将其感染卵巢癌SKOV3和HEY细胞,采用Real-time PCR方法检测靶基因在mRNA水平的沉默效率。 结果:构建的慢病毒载体shRNA的PC...
构建FAK基因RNA干扰慢病毒载体。方法 选定FAK基因RNAi靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA(引物),与经XhoⅠ和HpaⅠ双酶切后的慢病毒载体pLentilox3.7(pLL3.7)连接,产生pLL3.7 FAK慢病毒载体, 经XbaⅠ和NotⅠ酶切电泳筛选阳性克隆,测序鉴定。用PHR、pVSVG和pLL3.7 FAK慢病毒载体共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢...
目的: 应用载体介导的RNAi技术特异地干扰TGF-beta1在人胃癌细胞株SGC-7901和腹膜间皮细胞中的表达. 方法: 使用线性化的pcPUR beta iCassette质粒构建针对TGF-beta1基因的siRNA表达载体; hU6载体启动子下游插入含TGF-beta1基因特异性序列的62 mer寡核苷酸片段; 采用胰蛋白酶-EDTA消化法, 从人的腹膜组织中分离腹膜间皮细胞. 采用形态...
目的: 利用RNA干扰(RNA interfering,RNAi)技术,以DNMT1(DNA methyltransferase 1)为靶基因,设计构建重组体,研究其对胃癌细胞AGS中DNMT1表达的抑制作用.方法: 设计有小发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,再克隆至载体pTZU6+1中构建重组体,经鉴定正确后,转染胃癌细胞AGS,最后使用RT-PCR法定性分析DNMT1的mRNA水平和...
RNAi研究进展     RNAi  研究进展       2009/7/27
RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是由双链RNA(double-strandedRNA,dsRNA)引发的转录后基因静默机制. RNAi是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制. 目前已成功用于基因功能和信号转导系统上下游分子相互关系的研究,有可能为肿瘤基因治疗提供新策略.
探讨靶向骨桥蛋白基因(osteopontin,OPN)的siRNA片段对U87胶质瘤细胞生长和侵袭力的影响及其可能的作用机制。方法:根据OPN基因序列设计并合成的siRNA片段(OPN RNAi)转染U87细胞。MTT法检测U87细胞增殖;Western blotting检测OPN及基质金属蛋白酶(matrix metalloprotease,MMP)2、MMP9蛋白的表达;Transwell小室...
利用siRNA在乳腺癌细胞内诱导RNAi,抑制人端粒酶催化亚基(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因表达,在体外细胞水平探讨RNAi对MCF-7乳腺癌细胞生长的影响。 方法:构建靶向hTERT基因的siRNA(hTERT-siRNA),转导入MCF-7乳腺癌细胞,在瘤细胞内诱导RNAi,采用细胞增殖抑制实验、RT-PCR法、Western ...
目的: 观察抑制DcR3基因表达的人SW480结肠癌细胞其恶性表型的改变. 方法: 应用RNA干扰(RNAi)技术, 构建小双链DNA, 克隆入表达载体, 转染进入SW480结肠癌细胞系(DcR3高表达细胞), 在细胞内形成小干扰双链RNA; 识别并降解DcR3 mRNA. 筛选DcR3低表达转染癌细胞, 观测其体外DcR3-SW480-RNAi转染细胞的增长率及凋亡表达. 结果: 与对照组相比,...
目的: 探讨RNA干扰(RNA interference, RNAi)沉默促肝细胞再生磷酸酶3(proteins in regenerating liver cell-3, PRL-3)基因对大肠癌细胞侵袭的影响. 方法: 应用PRL-3基因小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)转染处理大肠癌细胞系HCT116后, 采用荧光实时定量PCR方法检测PRL-3基因mR...
RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术能特异性降解mRNA,沉默靶基因,在转录后水平抑制基因的表达,从而可用来进行基因功能的分析和药物靶标的研究。RNAi技术日趋成熟,已被广泛应用于生命科学的各个领域。在神经科学上,尤其是在神经退行性疾病,如阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、脊髓小脑性共济失调、肌萎缩性侧索硬化症、朊病毒病等的研究中取得了显著进展,RNAi的应用为神经退行性疾...

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